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首页> 中文期刊> 《安徽农业科学》 >索式桃花水母全长cDNA文库的构建

索式桃花水母全长cDNA文库的构建

         
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[目的]构建索式桃花水母的全长cDNA文库,为桃花水母的生长、发育、衰老过程功能基因的进一步筛选、克隆和表达奠定基础.[方法]利用RNAiso试剂盒提取桃花水母的总RNA,采用SMART技术合成全长cDNA,经SfiⅠ 酶切消化后,将cDNA克隆到质粒载体pDNR-LIB,并对cDNA文库进行质量评价.[结果]经鉴定,原始文库的滴度为7.9×105 cfu/ml,库容量约为1.0×10 6cfu.随机挑取28个克隆,经PCR快速鉴定,插入片段大小在0.5～2.5 kb,平均大小在1.0 kb左右,重组率达94%,表明获得了高质量的桃花水母cDNA文库.[结论]该试验成功构建了桃花水母cDNA文库,其cDNA原始文库的库容,根据真核生物能够满足建库的要求,同时文库的cDNA插入片段序列是完整的,从而证实构建的文库质量较好,可以用于桃花水母目的基因的筛选.

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