高产纤维素酶绿色木霉基因工程菌的构建

胡耀辉; 闫舟; 于寒松

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高产纤维素酶绿色木霉基因工程菌的构建

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[目的]构建CBH Ⅱ基因过量表达的绿色木霉工程菌. [方法]根据绿色木霉cDNA序列设计合成引物,PCR扩增CBH Ⅱ基因序列,将完整的目的基因与表达载体pCAMBIA1302连接,转入大肠杆菌DH5α中,获得重组质粒pCAMBIA1302-CBH Ⅰ.再将pCAMBIA1302-CBH Ⅰ重组质粒与瑞氏木霉外切葡聚糖纤维二糖水解酶Ⅱ(CBH Ⅱ)Pcbh Ⅱ启动子片段连接,将潮霉素磷酸转移酶(hyg)基因片段插入Pcbh Ⅱ启动子下游,转入大肠杆菌DH5α中,获得重组表达质粒pCAMBIA1302- CBH Ⅱ.[结果]构建的重组表达质粒电转化后经SDS-PAGE电泳检测,绿色木霉纤维素酶CBH II基因在原宿主菌中成功过量表达,证实CBH Ⅱ基因在Pcbh Ⅱ启动子控制下进行高效表达.[结论]为高产纤维素酶系的工业化菌株构建奠定基础.

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来源
《安徽农业科学》 |2010年第25期|13617-1361913625|共4页
作者
胡耀辉; 闫舟; 于寒松;
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作者单位

吉林农业大学食品科学与工程学院;

吉林长春;

130118;

吉林农业大学食品科学与工程学院;

吉林长春;

130118;

吉林农业大学食品科学与工程学院;

吉林长春;

130118;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类酶制剂（酵素）;
关键词
绿色木霉; CBH Ⅱ基因; 瑞氏木霉启动子; 外源基因表达系统;

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