牛血清白蛋白对连香树PCR反应体系的优化

黄绍辉; 方炎明

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牛血清白蛋白对连香树PCR反应体系的优化

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[目的]为了取得更好的PCR扩增效果,建立高效的PCR反应体系.[方法]首先通过6因素5水平的正交试验对连香树RAPD-PCR反应体系优化组合,然后不再改变该结果中的其他条件,而仅改变Taq酶的浓度及在反应体系中加入不同浓度的牛血清白蛋白(BSA).[结果] 在25组Taq酶和BSA浓度组合中,BSA改善连香树RAPD-PCR反应的最佳浓度为0.6 μg/μl,Taq酶浓度可由1.0 μg/μl减少至0.4 μg/μl.最后优化得到的20.0 μl连香树RAPD反应体系为: 25 mmol/L Mg2+ 2.0 μl,dNTPs 0.4 μl,1 U的TaqDNA酶1.0 μl,10×Buffer缓冲液2.5 μl,0.5 OD引物0.8 μl,约25 ng模板0.6 μl. [结论]BSA的适当加入减少了Taq酶的用量,在保证更好的试验效果前提下,节约了试验成本.

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来源
《安徽农业科学》 |2010年第26期|14260-14261|共2页
作者
黄绍辉; 方炎明;
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作者单位

徐州工程学院;

江苏徐州;

221008;

南京林业大学;

江苏南京;

210037;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类森林植物学;
关键词
牛血清白蛋白; 连香树; RAPD-PCR; 反应体系优化;

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