毛栓菌漆酶基因克隆及其酵母表达载体的构建

闵凯; 宋瑞清; 邓勋

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毛栓菌漆酶基因克隆及其酵母表达载体的构建

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摘要

[目的]研究毛栓菌漆酶基因克隆及其酵母表达载体的构建,为研制高品质酶制剂,实现其工业化生产和规模化应用奠定了基础.[方法]以毛栓菌总RNA为模板,通过RT-PCR克隆去信号肽的漆酶基因;通过BLAST比对,对毛栓菌漆酶基因序列的同源性进行分析;对质粒pPIC9K进行EcoR Ⅰ和Not Ⅰ进行酶切,构建其酵母表达载体p9K+Lac.[结果]去信号肽的漆酶基因编码框全长为1 512 bp,编码506个氨基酸,分子量为54 KDa;毛栓菌漆酶基因与NCBI中提交的毛栓菌基因序列同源性达到了99%.[结论]通过RT-PCR得到了漆酶基因全长,重组毕赤酵母表达载体p9K+Lac的构建是完全正确的.

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来源
《安徽农业科学》 |2009年第27期|12975-1297713110|共4页
作者
闵凯; 宋瑞清; 邓勋;
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作者单位

东北林业大学林学院;

黑龙江哈尔滨;

150040;

东北林业大学林学院;

黑龙江哈尔滨;

150040;

黑龙江省森林保护研究所;

黑龙江哈尔滨150040;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类农业生物工程;
关键词
毛栓菌; 漆酶基因; 克隆; 表达载体构建;

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