白菜总RNA的高效提取方法及常见问题分析

王海玮; 姜文轩; 范淑英; 吴才君

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白菜总RNA的高效提取方法及常见问题分析

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[目的]建立从白菜叶片组织中快速提取高质量RNA的方法,为进行LD-PCR、AFLP、SRAP及其他分子生物学试验奠定基础.[方法]通过增加高速离心时间,用3%H2O2处理试验器皿等措施对Trizol 试剂法进行优化,建立了一种简单、快捷、经济、高效的RNA提取方法.[结果]在 1.5 h 左右可得到高质量的总RNA,经琼脂糖凝胶电泳、蛋白核酸分析仪检测,提取的总 RNA 具有清晰的 28 S、 18 S、5 S 3条带,且28 S的宽度是18 S的2倍左右,OD260/OD280比值为1.90～2.16.进一步以提取的总RNA为模板成功进行了单链 cDNA的合成和LD-PCR.[结论]改良的 Trizol试剂法所提取的 RNA纯度和完整度极高,可用于LD-PCR、SRAP、基因克隆及表达分析等后续分子生物学试验.

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来源
《安徽农业科学》 |2009年第27期|12945-12947|共3页
作者
王海玮; 姜文轩; 范淑英; 吴才君;
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作者单位

江西农业大学农学院;

江西南昌;

330045;

江西农业大学农学院;

江西南昌;

330045;

江西农业大学农学院;

江西南昌;

330045;

江西农业大学农学院;

江西南昌;

330045;

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正文语种 chi
中图分类大白菜;
关键词
白菜叶片; 总RNA提取; LD-PCR;

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