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PCV2·ORF2基因片段在大肠杆菌中的表达与纯化

         

摘要

[目的]为了研究PCV2-ORF2基因片段在大肠杆菌中的表达与纯化.[方法]用PCR方法扩增PCV2 ORF2基因3'端片段,PCR产物经酶切后与经同样处理过的pET32a质粒连接,构建重组质粒.重组质粒经PCR和酶切鉴定并测序后,转化BL21感受态细胞;重组菌液用IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析.[结果] ORF2基因在大肠杆菌中正确表达,表达的融合蛋白的分子量约为33 ku;在37 ℃、1 mmol/L浓度下,诱导时间为6 h时表达量最大,占细菌总蛋白的23.62%.表达产物主要以包涵体的形式存在,将包涵体溶解后过Ni-NTA柱纯化可得到较为纯净的目的蛋白.[结论]该研究为猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)和猪皮炎和肾病综合征(PDNS)等疾病的防治奠定了基础.

著录项

  • 来源
    《安徽农业科学》 |2007年第23期|7117-71187121|共3页
  • 作者单位

    华南农业大学动物科学院基因工程室;

    广州广东;

    510642;

    河南科技学院动物科学院;

    新乡河南;

    453003;

    华南农业大学动物科学院基因工程室;

    广州广东;

    510642;

    华南农业大学动物科学院基因工程室;

    广州广东;

    510642;

    华南农业大学动物科学院基因工程室;

    广州广东;

    510642;

    华南农业大学动物科学院基因工程室;

    广州广东;

    510642;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 基因工程(遗传工程);
  • 关键词

    猪圆环病毒Ⅱ型; ORF2; 表达;

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