正交优化法建立沙打旺ISSR-PCR最佳反应体系

陈志宏; 黄琳凯; 张新全; 王志刚

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正交优化法建立沙打旺ISSR-PCR最佳反应体系

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根据正交试验设计的原理,设计了探索性正交试验和细调性正交试验来确定沙打旺ISSR-PCR体系中各成分的浓度.得到既稳定又能扩出最多条带的适合沙打旺的ISSR-PCR最佳反应体系,即20 μl的反应体系中含有1×buffer,dNTP 0.2 mmol/L,Taq酶1.0 U,引物0.3 μmol/L,Mg2+2.5 mmol/L,DNA模板2.5 ng/μl.然后对沙打旺ISSR-PCR最佳反应体系进行梯度退火试验,得到这条引物的最佳退火温度为54.1 ℃.这一最佳体系的建立为今后利用ISSR标记技术,研究沙打旺的遗传多样性提供了标准化程序.

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来源
《安徽农业科学》 |2006年第13期|2980-2982|共3页
作者
陈志宏; 黄琳凯; 张新全; 王志刚;
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作者单位

全国畜牧兽医总站畜禽牧草种质资源保存利用中心;

北京;

100094;

四川农业大学动物科技学院草业科学系;

四川雅安;

625014;

四川农业大学动物科技学院草业科学系;

四川雅安;

625014;

全国畜牧兽医总站畜禽牧草种质资源保存利用中心;

北京;

100094;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类植物生物化学实验;
关键词
沙打旺; ISSR; 正交优化; 反应体系;

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