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猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白1α多克隆抗体的制备及应用

         

摘要

以真核质粒pcDNA3.1-flag-nsp1α为模板,利用PCR扩增出nsp1α基因片段,构建原核重组载体pET32a-nsp1α,转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态,1 mmol/L IPTG在37℃诱导表达6 h,成功获得以包涵体形式存在的重组蛋白,能够与小鼠抗His标签单克隆抗体反应;包涵体复性后作为抗原免疫新西兰大白兔,3次免疫后20 d获得兔多抗血清.通过间接ELISA、Western blot、间接免疫荧光、免疫组化等试验获得了高效价的兔多抗血清,该血清能够特异性地识别真核质粒表达的nsp1α以及PRRSV BJ4株.该试验成功表达了pET32a-nsp1α重组蛋白,并制备了高效价、高特异性的兔抗nsp1α多克隆抗体.

著录项

  • 来源
    《安徽农业科学》 |2019年第12期|115-119131|共6页
  • 作者单位

    河南农业大学生命科学学院;

    河南郑州450002;

    河南省农业科学院动物免疫学重点实验室;

    河南郑州450002;

    河南师范大学生命科学学院;

    河南新乡453002;

    河南师范大学生命科学学院;

    河南新乡453002;

    河南师范大学生命科学学院;

    河南新乡453002;

    河南省农业科学院动物免疫学重点实验室;

    河南郑州450002;

    河南农业大学生命科学学院;

    河南郑州450002;

    河南省农业科学院动物免疫学重点实验室;

    河南郑州450002;

    河南农业大学生命科学学院;

    河南郑州450002;

    河南省农业科学院动物免疫学重点实验室;

    河南郑州450002;

    河南省农业科学院动物免疫学重点实验室;

    河南郑州450002;

    河南师范大学生命科学学院;

    河南新乡453002;

    河南农业大学生命科学学院;

    河南郑州450002;

    河南省农业科学院动物免疫学重点实验室;

    河南郑州450002;

    河南师范大学生命科学学院;

    河南新乡453002;

    河南省农业科学院动物免疫学重点实验室;

    河南郑州450002;

    河南省农业科学院动物免疫学重点实验室;

    河南郑州450002;

    河南省农业科学院动物免疫学重点实验室;

    河南郑州450002;

    河南省农业科学院动物免疫学重点实验室;

    河南郑州450002;

    西北农林科技大学动物医学院;

    陕西杨凌712100;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 猪瘟病毒;
  • 关键词

    PRRSV; nsp1α; 多克隆抗体;

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