1株假单胞菌oprD基因缺失和回补载体的构建

朱艳容; 刘志新; 杨靖; 韩韵; 陈果; 徐祥

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1株假单胞菌oprD基因缺失和回补载体的构建

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[目的]构建假单胞菌毒性基因(oprD)缺失突变株,为进一步探讨其编码的毒力因子功能奠定基础。[方法]利用pEX18Gm质粒作为基因敲除的载体,构建假单胞菌oprD基因重组自杀质粒,通过同源重组并激活自杀基因方式,筛选到目的基因缺失的突变株,再利用pBBR1MCS-2质粒作为目的基因回补的载体,构建回补载体。[结果]同源重组后,经过庆大霉素和氯霉素双抗平板、蔗糖平板筛选和PCR鉴定,成功获得了oprD基因缺失突变株,类似操作获得了回补菌株。[结论]基因缺失突变株的成功构建可为下一步的毒性机理研究奠定基础。

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来源
《安徽农业科学》 |2022年第2期|109-111|共4页
作者
朱艳容; 刘志新; 杨靖; 韩韵; 陈果; 徐祥;
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作者单位

湖北医药学院基础医学院;

湖北十堰442000;

长江水利委员会水文局汉江水文水资源勘测局;

湖北襄阳441000;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类农业生物工程;
关键词
假单胞菌; 毒力因子; 基因敲除; 基因回补;

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