萘胁迫下水稻幼苗抑制差减杂交cDNA文库构建

赵胡

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萘胁迫下水稻幼苗抑制差减杂交cDNA文库构建

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从200mg/Kg萘胁迫水稻幼苗根系中成功分离和纯化了高纯度的总RNA和mRNA,并以无萘处理为Driver,以200mg/Kg的幼苗为Tester,通过cDNA双链的合成及两次PCR扩增,富集到两组处理中差异表达的大小在200～800bp的cDNA序列,pGEMT的连接和蓝白斑筛选表明杂交文库滴度和重组率分别达到1.5×106 pfu/mL和96%,共收集阳性克隆8000个,形成了抑制消减杂交的质粒cDNA文库.随机挑取酶切质粒的电泳分析表明,载体中均有插入片段.高效抑制消减杂交文库的建立为进一步分析基因的差异表达及分离萘胁迫下抗性基因奠定了基础.

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来源
《生物学杂志》 |2008年第3期|48-50|共3页
作者
赵胡;
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作者单位

阜阳师范学院生物系,安徽,阜阳,236041;

中国农业科学院生物技术研究所,北京,100081;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 Q291;
关键词
萘; 水稻; 抑制差减抑制杂交; cDNA文库;

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