毕赤酵母中抗癌镇痛肽肺靶向融合体表达载体——穿梭质粒pPIC9K-RGD-4C-His Tag-AGAP的构建

马建荣; 余永红; 张景海

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采用PCR的方法对AGAP(anti-cancer analgesic peptide,抗癌镇痛肽)的N端进行了基因改造,保留了Kex2初步切割信号序列,去除了Ste13的切割序列,加入了对蝎毒蛋白抗癌镇痛活性无影响的氨基酸作为linker.通过构建辅助质粒pPIC6K,避免了kan基因内部的Xho I酶切位点对基因克隆的影响,构建了中介质粒pPIC6K-RGD-4C-His Tag-AGAP,该质粒经BamH I和EcoR I双酶切取得所需DNA片段,与同样经过双酶切的质粒pPIC9K进行连接,最终成功构建了酵母表达质粒pPIC9K-RGD-4C-His Tag-AGAP,测序结果表明,抗癌镇痛肽肺靶向融合体基因已成功插入到酵母表达载体pPIC9K中.

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来源
《生物学杂志》 |2011年第5期|60-6469|共6页
作者
马建荣; 余永红; 张景海;
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作者单位

广东食品药品职业学院实训中心广东广州 510520;

广东食品药品职业学院实训中心广东广州 510520;

沈阳药科大学生命科学与生物制药学院辽宁沈阳 110016;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因工程（遗传工程）;
关键词
pPIC9K; 毕赤酵母; 构建; 穿梭质粒;

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