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VEGF基因治疗靶向载体的构建及其特异性表达分析

         

摘要

目的:构建KDR启动子介导的VEGF逆转录病毒载体pLXSN-D299-KDRp-VEGF165,并对其内皮细胞特异性表达作用进行分析.方法:将逆转录病毒载体3'LTR的U3区缺失299个碱基使其自身启动子失活,然后重组pLXSN-D299-KDRp-VEGF165载体.经PA317细胞包装,NIH3T3细胞测定其病毒滴度.用高病毒滴度细胞株产生的病毒上清分别感染ECV304人脐静脉血管内皮细胞和NIH3T3细胞,收集细胞培养上清经ELISA和western Blot分析.结果:VEGF165在内皮细胞ECV304中的表达量明显高于NIH3T3细胞.结论:构建的pLXSN-D299-KDRp-VEGF载体,可在内皮组织细胞中特异性地表达VEGF.

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