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原卟啉介导的光动力疗法对结肠癌HCT116细胞的杀伤和促凋亡作用及其机制

         

摘要

目的:研究原卟啉(protoporphyrin Ⅸ,PpⅨ)介导的光动力疗法对结肠癌HCT116细胞的杀伤和促凋亡作用及其可能机制.方法:0,0.5,1,2,4,8,12μg/mL的PpⅨ处理后给予0,5,10 J/cm2光照,用细胞增殖检测试剂盒(cell counting kit 8,CCK8)检测HCT116细胞存活率.用Hoechst 33342染色法及流式细胞术检测空白对照组、单光照组、单PpⅨ组、光动力组细胞的凋亡情况.Western印迹检测细胞凋亡相关蛋白bcl-2,bax,caspase-3的表达.ROS试剂盒及流式细胞术检测ROS的产量变化.结果:相同的光照剂量时,细胞存活率随着PpⅨ剂量增大而逐渐降低(P<0.05).相同的光敏剂浓度(<12 μg/mL)时,细胞存活率随着光照剂量的增强而降低(P<0.05).Hoechst 33342染色发现光动力组凋亡细胞相比其他3组高.流式细胞仪检测发现光动力组的HCT116细胞凋亡率、ROS产量均高于其他3组(P<0.05).Western印迹检测发现光动力组bax,caspase-3蛋白表达增加,bcl-2蛋白表达降低(P<0.05).结论:PpⅨ介导的光动力疗法能促使HCT116细胞凋亡,ROS含量提高,可能与线粒体凋亡途径有关,通过多因素综合作用发挥效应.%Objective:To explore the effects of protoporphyrin Ⅸ (PpⅨ)-mediated photodynamic therapy (PDT) on induction of apoptosis and death in colon cancer cell and the underlying mechanisms.Methods:The cell killing effect of PDT on HCT116 cell was determined by cell counting kit (CCK).The cells were divided into a control group,a single light group,a single PpⅨ group,and a PDT group.Hoechst 33342 and flow cytometry was used to assess the cell apoptosis.Western blot was employed to analyze the expressions ofbd-2,bax,and caspase-3.Reactive oxygen species (ROS) was detected by flow cytometry.Results:The viability of HCT116 cell was decreased gradually with the increase of irradiation dose (P<0.05).Compared to the other 3 groups,ROS production,the number of apoptotic cells and the protein expressions ofbax and caspase-3 in PDT group increased,while bcl-2 expression was decreased (P<0.05).Conclusion:PpⅨ-mediated PDT can enhance the apoptosis in HCT116 cell,which may be related to mitochondrial apoptosis pathway.

著录项

  • 来源
    《中南大学学报(医学版)》 |2017年第8期|874-881|共8页
  • 作者单位

    中南大学湘雅二医院普通外科,长沙410011;

    中南大学湘雅二医院普通外科,长沙410011;

    德克萨斯州大学物理系,德克萨斯州阿灵顿76019-0059,美国;

    中南大学湘雅二医院普通外科,长沙410011;

    中南大学湘雅二医院普通外科,长沙410011;

    中南大学湘雅二医院普通外科,长沙410011;

    中南大学湘雅二医院普通外科,长沙410011;

    中南大学湘雅二医院普通外科,长沙410011;

    中南大学湘雅医学院组织学与胚胎学教研室,长沙410078;

    中南大学粉末冶金学院,长沙410083;

    中南大学湘雅二医院普通外科,长沙410011;

    德克萨斯州大学物理系,德克萨斯州阿灵顿76019-0059,美国;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类
  • 关键词

    光动力疗法; 原卟啉Ⅸ; 结肠癌; 杀伤; 凋亡; ROS;

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