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金龟子绿僵菌深层培养产几丁质酶的研究

         
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金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)是一种重要的昆虫寄生真菌,从自然罹病死亡的金龟子体内分离到一株金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)M-6.研究了该菌深层培养产几丁质酶的情况,几丁质酶合成的最佳碳源和诱导物为几丁质,在以0.5%(w/v)几丁质为碳源时,其产几丁质酶活达0.126IU·mL-1,在一定范围内增加培养基中几丁质浓度,葡萄糖浓度,微量元素盐浓度和碳氮比都能提高几丁质酶活.胆汁酸和吐温80作为表面活性剂能显著提高几丁质酶活.通过摇瓶试验得到优化培养基和培养条件.根据优化条件在摇瓶和3.7L发酵罐中分别进行产酶试验, 实验结果表明,几丁质酶活分别达到0.231 IU·mL-1和0.273 IU·mL-1.最适反应温度为55℃,最适反应pH6.0,在45℃,pH 3.0～ 9.5较为稳定.Zn2+、Ca2+、Ba2+和Mn2+离子对几丁质酶活性有明显的促进作用,而Hg2+、Co2+和Fe2+离子完全抑制几丁质酶的活性.

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