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双柱连续流层析亲和分离抗体的过程设计与应用

         

摘要

针对单抗生产下游过程的瓶颈-蛋白A亲和分离,以提高产率和降低成本为目标,探讨了双柱连续流层析的新方法.从过程设计的关键因素出发,比较和分析了保留时间和蛋白浓度的影响,优化了分离条件,并应用于细胞培养液中单抗的分离.以两种蛋白A亲和介质MabSelect SuRe和UniMab为典型介质,考察了不同保留时间和IgG浓度下的穿透曲线,比较了保留时间和蛋白浓度对产率、介质利用率和缓冲液消耗的影响.结果表明,与常规的批次层析相比,双柱连续流层析拥有更优越的分离性能,低保留时间条件下的产率和介质利用率显著提高,缓冲液消耗减少,特别适合于高流速操作.对于从细胞培养液中分离单抗,双柱连续流层析的分离性能与常规批次层析相当,单抗纯度在97%以上、收率87%以上、聚集体含量低于2%、宿主细胞蛋白含量低于300 ppm,优势是产率提高,介质利用率从20%~30%提高到70%~80%,,缓冲液消耗下降为常规批次层析过程的1/5~1/4,显示出良好的应用前景.

著录项

  • 来源
    《高校化学工程学报》 |2019年第1期|117-127|共11页
  • 作者单位

    浙江大学生物质化工教育部重点实验室;

    浙江大学 化学工程与生物工程学院;

    浙江 杭州 310027;

    浙江大学生物质化工教育部重点实验室;

    浙江大学 化学工程与生物工程学院;

    浙江 杭州 310027;

    浙江大学生物质化工教育部重点实验室;

    浙江大学 化学工程与生物工程学院;

    浙江 杭州 310027;

    浙江大学生物质化工教育部重点实验室;

    浙江大学 化学工程与生物工程学院;

    浙江 杭州 310027;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 新型分离法;
  • 关键词

    连续流层析; 抗体; 分离; 产率; 介质利用率;

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