全人源抗鼻咽癌噬菌体单链抗体的筛选与鉴定

李艳东; 谢平丽; 王甲甲; 李跃辉; 胡锦跃; 李官成

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全人源抗鼻咽癌噬菌体单链抗体的筛选与鉴定

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＜正＞目的从全人源抗鼻咽癌噬菌体抗体库中筛选特异性单链抗体（ScFv）,并对其特异性进行鉴定。方法通过噬茵体表面展示技术把ScFv表达在噬茵体表面,以鼻咽癌细胞作为抗原,用抗原递减法,通过"吸附-洗脱-扩增"过程筛选并富集特异性抗体,及ELISA筛选,获得特异阳性克隆进行免疫组化鉴定并测序。结果通过对抗体库进行三轮正负淘洗和富集后,随机挑选4212个克隆进行ELISA,发现3个克隆对CNE2呈强阳性反应,而与人正常细胞系HUVEC等呈弱阳性反应或不反应。对克隆HNSA033进一步进行免疫细胞化学验证,结果与ELISA反应一致;免疫组织化学鉴定表明克隆HNSA033与鼻咽癌组织和鼻咽组织阳性率的差别有统计学意义。结论通过淘选富集、ELISA和免疫化学鉴定获得特异性较强的噬茵体克隆,为鼻咽癌发病机制的研究和临床诊断以及治疗奠定了基础。

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来源
《中国医师杂志》 |2009年第5期||共页
作者
李艳东; 谢平丽; 王甲甲; 李跃辉; 胡锦跃; 李官成;
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作者单位

中南大学湘雅医学院肿瘤研究所;

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正文语种 chi
中图分类咽肿瘤;
关键词
细菌噬菌体/免疫学; 抗体; 单克隆/生物合成; 鼻咽肿瘤/免疫学;

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