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长链非编码RNA LINC01204上调GPC5基因表达对膀胱癌恶性生物学行为的影响

         
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目的探讨长链非编码RNA LINC01204对膀胱癌细胞磷脂酰肌醇蛋白聚糖-5(GPC5基因表达的上调作用及对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法实时定量荧光聚合酶链反应（qRT-PCR）检测12例膀胱癌组织及癌旁组织、膀胱癌细胞株BIU-87、T24、J82、5637和正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中LINC01204的表达量。以表达量最低的膀胱癌细胞为转染对象,用携带LINC01204的慢病毒颗粒转染细胞（观察组）和阴性对照慢病毒颗粒转染细胞（对照组）,qRT-PCR检测两组细胞中LINC01204和GPC5 mRNA表达量。Western blot检测两组细胞中GPC5蛋白的表达。细胞计数试剂盒（CCK-8）、Transwell小室实验分别测定细胞增殖、迁移和侵袭能力。结果膀胱癌组织中LINC01204表达量（0. 773±0. 063）明显低于癌旁组织（3. 665±0. 330）,差异有统计学意义（t=8. 612,P ＜0. 001）。膀胱癌细胞株BIU-87（0. 320±0. 034）、T24（0. 515±0. 056）、J82（0. 644±0. 039）、5637（0. 147±0. 018）中LINC01204表达水平均低于正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1 （1. 009±0. 077）,差异均有统计学意义（t=8. 160,P ＜0. 001; t=5. 179,P=0. 002; t=4. 221,P=0. 006; t=10. 890,P ＜0. 001）,5637细胞表达量最低。观察组5637细胞中LINC01204表达量（11. 000±1. 028）明显高于对照组（1. 019±0. 119）,差异均有统计学意义（t=9. 651,P ＜0. 001）。观察组GPC5 mRNA表达量（4. 476±0. 347）明显高于对照组（1. 046±0. 163）,差异均有统计学意义（t=8. 962,P ＜0. 001）。Western blot结果显示,观察组5637细胞中GPC5蛋白表达上调。与对照组相比,观察组转染LINC01204后的5637细胞从第3天（0. 686±0. 044 vs 0. 536±0. 026,t=2. 943,P=0. 026）开始增殖能力明显降低。观察组5637细胞迁移数[（118. 300±16. 260）个]明显低于对照组[（208. 200±22. 930）个],差异均有统计学意义（t=3. 198,P=0. 019）。观察组5637细胞侵袭数[（50. 390±5. 368）个]明显低于对照组[（97. 480±15. 350）个],差异均有统计学意义（t=2. 896,P=0. 028）。结论LINC01204可上调GPC5基因的表达,抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭,针对LINC01204的靶向治疗有望成为膀胱癌新的基因治疗手段。

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