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小鼠来源调节性T细胞的体外扩增培养及鉴定

         

摘要

目的建立小鼠来源调节性T细胞(Tregs)体外扩增培养方法,并检测扩增细胞的表型及体外免疫抑制功能,为Tregs应用于临床免疫治疗提供实验基础。方法利用免疫磁珠分离(MACS)方法从BALB/c小鼠脾脏中分选出CD4+T细胞,加入anti-CD3/CD28抗体、100 U/ml白细胞介素-2(IL-2)和5 ng/ml重组人转化生长因子β(rhTGF-β)体外扩增5 d。流式细胞术检测扩增后Tregs纯度及免疫抑制功能,台盼蓝染色法测定扩增后Tregs的数量和活性。结果扩增5 d后Tregs数目约为新鲜分选CD4+T细胞的20倍,细胞活性为(93±4)%。扩增得到的Tregs纯度为(79. 1±1. 5)%且具有免疫抑制功能。结论本实验方法可以大量扩增出高纯度且具有免疫抑制功能的Tregs,解决了Tregs数目少的问题,有利于进一步的免疫研究和治疗。

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