目的利用Pnpla3^(148M/M)纯合小鼠与Tm6sf2^(167K/K)纯合小鼠杂交方法构建Pnpla3^(148M/M)Tm6sf2^(167K/K)双突变小鼠模型。方法利用Pnpla3Ⅰ148M和Tm6sf2 E 167K单突变纯合小鼠交配出Pnpla3^(148M/M)Tm6sf2^(167K/K)双突变杂合小鼠,再通过自交得到Pnpla3^(148M/M)Tm6sf2^(167K/K)双突变纯合小鼠。选取同窝的Pnpla3^(148M/M)Tm6sf2^(167K/K)(n=6)、Pnpla3^(148M/M)Tm6sf2^(167E)/E(n=6)、Pnpla3^(148I/I) Tm6sf2^(167K/K)(n=6)和野生(Wt)(n=6)雄性小鼠普通饮食喂养8周,在第8周检测小鼠葡萄糖及脂质代谢等指标。多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果琼脂糖凝胶电泳和核酸测序结果表明Pnpla3^(148M/M)Tm6sf2^(167K/K)双突变小鼠模型构建成功。Pnpla3^(148M/M)Tm6sf2^(167K/K)小鼠体质量与其他3种基因型小鼠比较,差异无统计学意义(P值均>0.05),Pnpla3^(148M/M)Tm6sf2^(167K/K)小鼠肝湿重高于Wt小鼠(P0.05)。Pnpla3^(148M/M)Tm6sf2^(167K/K)双突变小鼠的血浆生化指标与其他三种基因型小鼠比较,差异均无统计学意义(P值均>0.05)。肝脏油红O切片染色结果显示Pnpla3^(148M/M)Tm6sf2^(167K/K)双突变小鼠的肝脏较Pnpla3^(148M/M)单突变小鼠和Wt小鼠更容易发生脂质积累。结论Pnpla3^(148M/M)Tm6sf2^(167K/K)双突变小鼠模型构建成功,Pnpla3Ⅰ148M和Tm6sf2 E 167K双突变可引起小鼠葡萄糖代谢异常。
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