• 主题
高级搜索  >
历史搜索 清空历史
首页> 中文期刊> 《临床肾脏病杂志》 >LncRNA XIST/FUS/TLR9分子轴在IgA肾病Th17/CD4+T细胞中的表达及其功能性研究

LncRNA XIST/FUS/TLR9分子轴在IgA肾病Th17/CD4+T细胞中的表达及其功能性研究

         
页面导航
  • 摘要
  • 著录项
  • 相似文献
  • 相关主题

摘要

目的研究lncRNA XIST在IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)Th17细胞中的表达及功能作用,探讨lncRNA XIST对TLR9 mRNA表达的调控作用。方法(1)外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)体外分离出CD4+T细胞并诱导其分化为Th17细胞;(2)利用质粒转染技术使Th17细胞过表达和沉默表达XIST;(3)流式细胞术与CCK-8实验检测XIST不同表达水平Th17细胞的增殖能力及凋亡情况变化;(4)qRT-PCR法及Western blot法检测XIST、TLR9mRNA及蛋白水平,并通过荧光素酶报告基因分析和TLR9mRNA半衰期检测,推测XIST对TLR9表达的作用;(5)通过Starbase数据库查找潜在与XIST相互作用的RNA结合蛋白,并进行RNA结合蛋白免疫沉淀、Western blot检测;(6)使用GraphPad 8.0进行统计分析,并以xˉ±s表示。组间差异分别采用t检验或单向方差分析。结果XIST主要分布在Th17细胞胞质中,推测XIST可能参与转录后调控;lncRNA XIST表达下调促进细胞凋亡、DNA损伤,并通过调节Th17细胞中的TLR9抑制细胞增殖;随着lncRNA XIST高表达,TLR9表达增高,XIST通过促进TLR9 mRNA的稳定性来上调TLR9的表达。FUS(fused in sarcoma)是与XIST相互作用的RNA结合蛋白,FUS抗体可以显著富集XIST转录本。下调lncRNA XIST表达对FUS蛋白的表达没有影响,由此推测XIST可能是通过影响FUS的功能而不是表达来发挥作用的。进一步证实,下调XIST显著降低了FUS与TLR9 mRNA的结合,FUS过表达挽救了si-XIST诱导的TLR9下调和降解。结论lncRNA XIST和TLR9通过RNA结合蛋白FUS介导的信号通路对IgAN中Th17的细胞增殖起着至关重要的作用。

著录项

相似文献

  • 中文文献
  • 外文文献
获取原文

客服邮箱：kefu@zhangqiaokeyan.com

京公网安备：11010802029741号 ICP备案号：京ICP备15016152号-6 六维联合信息科技 (北京) 有限公司©版权所有

  • 客服微信

  • 服务号