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人表皮生长因子(hEGF)基因合成及在枯草杆菌BS9920中分泌表达

         

摘要

采用PCR技术人工合成了一段长约175bp的人表皮生长因子(hEGF)的基因片段.为了便于克隆,在该片段的5'端设计了PstⅠ的酶切位点及与Pus186载体signal sequence 相连接的碱基部分,在3'设计了HindⅢ的酶切位点及终止密码子.经DNA测序分析,合成的片段与已发表的hEGF在序列上完全一致;之后将其克隆至枯草杆菌分泌型质粒载体pUS186上,构建重组载体pUSE并转化一株枯草杆菌突变菌株BS9920感受态细胞;以PCR法快速筛选重组菌落,RIA检测结果表明BS9920阳性转化子能够表达和分泌hEGF。

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