为了研究人脐血(CB)、外周血(PB)及G-CSF动员后外周血采集物单个核细胞(G-PBMNC)中Vα24+NKT细胞的表型及体外扩增、细胞因子分泌情况,分别取来自CB和PB的单个核细胞(MNC)以及G-PBMNC,在含α-半乳糖酰基鞘胺醇(α-GalCer)及细胞因子IL-2、IL-15的体系中,体外扩增培养Vα24+NKT细胞;采用间标磁珠分选纯化NKT细胞;流式细胞术(FCM)检测NKT细胞表型、NKT细胞含量;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定细胞因子IL4、IFN-γ浓度.结果表明:由CB或PB或G-PBMNC诱导扩增Vα24+NKT细胞可分别扩增221.5倍、456.5倍、756.38倍.CB或PB来源的Vα24+ NKT细胞经PMA刺激后,24小时生成IL4、IFN-γ浓度和IL-4/IFN-γ比率分别为180.33 vs 190.67 ng/ml、864.33 vs 508.49 ng/ml、0.503 vs 0.455.由G-PBMNC诱导扩增Vβ24+NKT细胞,培养9天及12天时生成IL-4、IFN-γ浓度及IL-4/IFN-γ比率分别为139.08 vs 89.3 ng/ml、14264.8 vs 38 14488 ng/ml、0.0531 vs 0.0376.结论:不同来源MNC在α-GalCer、IL-2、IL-15诱导下可以短期有效扩增Vα24+NKT细胞,G-PBMNC诱导扩增的效果优于CB和PB.NKT细胞活化后可以分泌大量IL-4及IFN-γ,但以IFN-γ为主.
展开▼
