绿藻ChlB基因和蓝藻NIES基因在溺死相关浮游生物检测中的应用

李欢; 徐曲毅; 刘超; 肖成; 赵建; 余仲昊; 杨幸怡; 李越; 万立华

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绿藻ChlB基因和蓝藻NIES基因在溺死相关浮游生物检测中的应用

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目的利用绿藻ChlB基因和蓝藻NIES基因,建立聚合酶链反应-毛细管电泳(polymerase chain reaction-capillary electrophoresis,PCR-CE)检测方法,验证该方法的特异性和灵敏度,并探讨其在溺死诊断中的应用价值.方法针对GenBank中绿藻ChlB基因和蓝藻NIES基因的保守序列,设计特异性引物ChlB和引物NIES,以此构建PCR-CE检测方法.扩增50种标准样本DNA.阳性标准样本梯度浓度检测,确定灵敏度.检测25例尸体肺组织样本(溺死20例,自然死亡5例),同时比较微波消解-真空抽滤-自动扫描电镜法(microwave digestion-vacuum filtration-automated scanning electron microscopy,MD-VF-Auto SEM)的同步检测结果.结果引物ChlB和引物NIES最低检测DNA含量分别为0.161、0.109 ng,可分别特异性扩增水体广泛存在的绿藻(蛋白核小球藻)和蓝藻[铜绿微囊藻(产毒及不产毒)],产物片段分别为156、182 bp,非溺死器官组织检测结果均为阴性.结论构建的方法灵敏度高、特异性好,能很好地应用于溺死相关浮游生物检测,与MD-VF-Auto SEM法联用,可以增大溺死相关浮游生物的检测范围,提高溺死诊断的证据力.

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来源
《法医学杂志》 |2021年第1期|58-64|共7页
作者
李欢; 徐曲毅; 刘超; 肖成; 赵建; 余仲昊; 杨幸怡; 李越; 万立华;
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作者单位

重庆医科大学基础医学院法医学教研室重庆 400016;

广州市刑事科学技术研究所法医病理学公安部重点实验室广东广州 510442;

广州市刑事科学技术研究所法医病理学公安部重点实验室广东广州 510442;

南方医科大学法医学院广东广州 510515;

广州市刑事科学技术研究所法医病理学公安部重点实验室广东广州 510442;

南方医科大学法医学院广东广州 510515;

广州市刑事科学技术研究所法医病理学公安部重点实验室广东广州 510442;

广州市刑事科学技术研究所法医病理学公安部重点实验室广东广州 510442;

重庆医科大学基础医学院法医学教研室重庆 400016;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类法医基础科学;
关键词
法医病理学; 法医遗传学; 溺水; 聚合酶链反应; 毛细管电泳; 蓝藻; 绿藻; ChlB基因; NIES基因;

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