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圆果黄麻成熟叶片总DNA提取及SRAP扩增体系的建立与优化

         
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摘要

Genomic DNA from jute (Corchorus capsularis L. ) extracted with modified CTAB method was tested for its concentration and quality by agarose gel electrophoresis and concentration detection. An optimum SRAP-PCR system was established based on optimizing the key factors of SRAP - PCR reaction system in jute. The results showed that the DNA isolated with modified CTAB method was in good quality, pure and integral. Z)260 nm/D280 nm value of the DNA was 1.7-1.9 using ultraviolet spectrophotometer determination. There was no degradation appeared and the proteins, phenols, etc. Were eliminated completely. The optimum SRAP-PCR reaction system could amplify high levels of polymorphism, had good repeatability and clear band pattern. SRAP system (total volume of 25 μL) was established as follows; Taq DNA polymerase 1.75 U, Mg2+ 3.0 mmol · L-1, dNTPs 0.16 mmol · L-1, forward primer 0.51 μmol · L-1, reverse primer 0.51 μmol · L-1, template DNA 80 -120 ng. It was showed that the optimized system in this study can be applied in the SRAP analysis for jute.%采用改良的CTAB法从圆果黄麻成熟叶片中提取基因组DNA,对DNA进行电泳检测、含量测定和SRAP分析,并对黄麻SRAP-PCR反应体系中主要影响因子进行了优化,建立了最佳反应体系.结果表明,改良的CTAB法能够提取高质量的DNA,DNA纯度和完整性都较好,经紫外分光光度计测定,D260nm/D280nm均在1.7-1.9之间,无降解现象,蛋白质、多糖类等去除彻底.所建立的SRAP最佳反应体系(25 μL)中5种成分的适宜浓度及用量分别为:Taq DNA聚合酶1.75 u,Mg2+3.0 mmol·L-,dNTPs 0.16 mmol·L-1,引物0.51 μmol · L-1,模板DNA 80-120 ng.

著录项

  • 来源
    《福建农林大学学报（自然科学版）》 |2011年第5期|461-466|共6页
  • 作者

    陈燕萍; 陈美霞; 徐建堂; 陈晖; 陶爱芬; 祁建民;

  • 作者单位

    福建农林大学作物遗传育种与综合利用教育部重点实验室;

    福建福州350002;

    福建省农业科学院农业生物资源所;

    福建福州350002;

    福建农林大学作物遗传育种与综合利用教育部重点实验室;

    福建福州350002;

    福建农林大学作物遗传育种与综合利用教育部重点实验室;

    福建福州350002;

    福建农林大学作物遗传育种与综合利用教育部重点实验室;

    福建福州350002;

    福建省东山出入境检验检疫局;

    福建潭州363401;

    福建农林大学作物遗传育种与综合利用教育部重点实验室;

    福建福州350002;

    福建农林大学作物遗传育种与综合利用教育部重点实验室;

    福建福州350002;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 黄麻（绿麻、络麻）;
  • 关键词

    圆果黄麻; DNA提取; SRAP反应体系;

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