荔枝基因枪转化研究初报

         

摘要

@@荔枝是我国南方重要的亚热带木本果树之一.近20 a来,国内外不少学者致力于将生物技术手段应用于荔枝品种改良研究[1,2],以期为荔枝育种开辟新途径.2000年以来,在已建立的荔枝体胚再生系统[1-3]的基础上,笔者采用基因枪法进行gus基因(β-gluccuronidaes gene)转化荔枝胚性愈伤组织的研究,初步探讨了荔枝基因枪转化的主要影响因素,为进一步建立荔枝遗传转化体系提供重要依据.试验选取旺盛生长的荔枝(“下番枝”、“元红”等品种)胚性愈伤组织,将它平铺于9 cm培养皿内(离中心约2 cm的圆内),预处理4 h,用基因枪轰击受体材料,后处理16 h,然后将轰击的荔枝愈伤组织转入继代培养基中恢复培养.分别将轰击后0、24、48、240 h的荔枝胚性愈伤组织浸于5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡糖苷酸(5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-glucuronic acid, X-Gluc)溶液中,于37 ℃过夜,检测蓝斑的数目(GUS染色方法参照Jefferson et al的方法[4],并略有改动).

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