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黄麻DNA提取与RAPD反应体系的建立

         

摘要

以假黄麻、假长果、越南圆果(圆果种黄麻)等为材料,研究了黄麻DNA的提取方法以及对RAPD分析的影响因素,包括模板浓度、Mg2+、dNTP、引物和Taq酶等,建立了适于黄麻种质RAPD分析的PCR反应体系.即在25 μL反应体积中,Tris-HCl(pH8. 0)、KCl、MgCl2、dNTP、随机引物的浓度分别为10 mmol*L-1、50 mmol*L-1、2. 5 mmol*L-1、150 μmol*L-1、0. 2 μmol*L-1,并含有30-60 ng DNA与1. 5 U Taq DNA聚合酶.扩增程序为:94 ℃预变性5 min;然后94 ℃ 30 s,37 ℃ 1. 5 min,72 ℃ 1 min,41个循环;最后72 ℃延伸7 min.

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