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罗非鱼SRA4基因重组表达、亚细胞定位及组织分布

         

摘要

[目的]研究尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)清道夫受体基因(On-SRA4)的重组表达、亚细胞定位及组织分布,为深入研究On-SRA4基因功能奠定基础.[方法]根据NCBI上公布的On-SRA4基因序列设计克隆引物,构建原核表达载体并诱导重组蛋白rOn-SRA4的表达.同时,采用生物信息学、亚细胞定位手段分析On-SRA4的结构特征,用实时定量PCR分析On-SRA4在头肾、胸腺、脾脏、肝、肠道、鳃、脑、肌肉、皮肤、血液的表达水平,用灭活无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)、病毒类似物Poly I:C刺激健康罗非鱼,分析On-SRA4在头肾、胸腺、脾脏、肠道的表达水平.[结果与结论]成功构建原核表达载体pET28a-OnSRA4,诱导获得目的蛋白rOn-SRA4,rOn-SRA4分子质量约80 ku.亚细胞定位显示,rOn-SRA4定位于细胞核与细胞质.组织定量分析表明,On-SRA4在所有组织中均有表达,且在血液中表达量最高,在灭活无乳链球菌与Poly I:C刺激后,健康罗非鱼胸腺、肠道、脾脏和头肾中On-SRA4表达量均显著升高,表明On-SRA4参与了病原引起的免疫反应,是罗非鱼抵抗病原的相关基因.

著录项

  • 来源
    《广东海洋大学学报》 |2021年第5期|19-27|共9页
  • 作者单位

    广东海洋大学水产学院 广东 湛江 524088;

    广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室 广东 湛江 524088;

    广东省水产经济动物病害控制重点实验室 广东 湛江 524088;

    广东海洋大学深圳研究院 广东 深圳 518000;

    广东省水生动物健康评估工程技术研究中心 广东 深圳 518000;

    广东海洋大学深圳研究院 广东 深圳 518000;

    广东省水生动物健康评估工程技术研究中心 广东 深圳 518000;

    广东海洋大学水产学院 广东 湛江 524088;

    广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室 广东 湛江 524088;

    广东省水产经济动物病害控制重点实验室 广东 湛江 524088;

    广东海洋大学深圳研究院 广东 深圳 518000;

    广东省水生动物健康评估工程技术研究中心 广东 深圳 518000;

    广东海洋大学深圳研究院 广东 深圳 518000;

    广东省水生动物健康评估工程技术研究中心 广东 深圳 518000;

    广东海洋大学水产学院 广东 湛江 524088;

    广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室 广东 湛江 524088;

    广东省水产经济动物病害控制重点实验室 广东 湛江 524088;

    广东海洋大学水产学院 广东 湛江 524088;

    广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室 广东 湛江 524088;

    广东省水产经济动物病害控制重点实验室 广东 湛江 524088;

    广东海洋大学深圳研究院 广东 深圳 518000;

    广东省水生动物健康评估工程技术研究中心 广东 深圳 518000;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 基因工程(遗传工程);鲈形目;
  • 关键词

    尼罗罗非鱼; On-SRA4; 重组表达; RT-qPCR; 亚细胞定位;

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