幽门螺杆菌外膜蛋白基因omp22克隆、表达和鉴定

黄学勇; 李永红; 段广才; 范清堂; 郗园林

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目的:克隆幽门螺杆菌外膜蛋白基因omp22,构建幽门螺杆菌omp22基因与麦芽糖结合蛋白基因融合表达载体,并进行诱导表达,鉴定融合蛋白免疫原性,为幽门螺杆菌疫苗研究提供依据.方法:利用 PCR 技术从Helicobacter pylori郑州分离株MEL-Hp27染色体DNA上扩增omp22基因,并将其克隆到表达载体pMAL-c2X中,转化大肠杆菌(E.coli TB1),用IPTG诱导目的基因表达,SDS-PAGE方法对表达产物进行分析,Western blot鉴定其免疫原性.结果:PCR方法扩增的omp22基因长度约为540 bp.经酶切鉴定,插入到表达载体的基因片段与预期目的DNA片段相一致;SDS-PAGE结果显示表达产物分子量约为22 ku,融合蛋白的表达量约占全菌总蛋白的26%.结论:成功克隆并构建了omp22基因高效原核表达系统,为幽门螺杆菌基因工程组分疫苗的研究奠定基础.

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来源
《广西医科大学学报》 |2010年第5期|678-680|共3页
作者
黄学勇; 李永红; 段广才; 范清堂; 郗园林;
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作者单位

河南省疾病预防控制中心,郑州,450016;

广西壮族自治区疾病预防控制中心,南宁,530028;

郑州大学公共卫生学院流行病学教研室,郑州,450001;

郑州大学公共卫生学院流行病学教研室,郑州,450001;

郑州大学公共卫生学院流行病学教研室,郑州,450001;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类肠道杆菌;
关键词
幽门螺杆菌; omp22 基因; 克隆; 基因表达;

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