删除C末端结构域的基质细胞衍生因子-1重组内质网定位片段的真核表达载体构建及其活性作用

陈宏远; 芮雯; 马伟峰; 蔡绍晖

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目的:构建人基质细胞衍生因子(SDF-1)C末端α螺旋结构域缺失及嵌合内质网定位片段的SDF-1α/54/KDEL重组真核表达载体,并考察其对Molt-4细胞的影响.方法:用PCR法扩增SDF-1α/54并将其亚克隆至真核表达质粒pcDNA3.1构建成真核重组表达载体pcDNA3.1/SDF-1α/54/KDEL.脂质体法转染Cos-7细胞后用Western blot检测SDF-1α/54/KDEL的表达.电穿孔法瞬时转染Molt-4细胞,并用流式细胞仪检测CXCR4含量以及其对细胞趋化性的影响.结果:经DNA 测序验证目的片段插入方向和碱基组成顺序均准确无误,Western blot证实融合蛋白能在Cos-7细胞表达.SDF-1α/54/KDEL可以显著降低胞膜表面CXCR4表达量并抑制细胞的趋化作用.结论:SDF-1α/54/KDEL可从胞内抑制Molt-4细胞CXCR4的表达,C末端α螺旋结构域的缺失并不影响其抑制作用,推测其是决定细胞趋化作用的主要结构域.

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来源
《广西医科大学学报》 |2009年第3期|342-345|共4页
作者
陈宏远; 芮雯; 马伟峰; 蔡绍晖;
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作者单位

广东药学院基础学院,广州,510006;

广东药学院基础学院,广州,510006;

南方医科大学公共卫生与热带医学学院;

暨南大学药学院;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类人体细胞学;
关键词
人基质细胞衍生因子(SDF-1); SDF-1α/54; CXCR4; 趋化作用;

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