高温胁迫下匍匐翦股颖酵母cDNA文库的构建与鉴定

刘畅; 董康挺; 张雅晰; 李静思; 边秀举; 李会彬; 王丽宏; 孙鑫博

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高温胁迫下匍匐翦股颖酵母cDNA文库的构建与鉴定

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为深入挖掘匍匐翦股颖高温胁迫相关基因,本研究以高温处理的匍匐翦股颖叶片为试验材料,用Trizol法提取其总RNA,再用SMART技术进行双链cDNA的合成及回收纯化,并与pDONR222/pGADT7-DEST载体相连接,完成匍匐翦股颖酵母cDNA文库的构建。通过试验构建了质量较好的匍匐翦股颖酵母cDNA文库,文库容量为1.36×10^(7) CFU,所插入的匍匐翦股颖平均片段长度>1000 bp,选取的24个克隆经过PCR检测全部能够显示出条带,重组率为100%。通过使用SMART技术建立酵母cDNA文库的方法,获得了质量较高的匍匐翦股颖cDNA文库,为研究匍匐翦股颖相关基因的蛋白筛选试验做准备。

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来源
《河北农业大学学报》 |2022年第5期|51-55|共6页
作者
刘畅; 董康挺; 张雅晰; 李静思; 边秀举; 李会彬; 王丽宏; 孙鑫博;
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作者单位

河北农业大学农学院/河北省作物生长调控重点实验室;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类草坪与地被植物;
关键词
匍匐翦股颖; CDNA文库; 酵母双杂交;

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