苏云金芽孢杆菌质粒复制区的分离克隆

任莹博; 张杰; 宋福平; 李国勋; 王勤英; 黄大昉

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苏云金芽孢杆菌质粒复制区的分离克隆

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Bt-E.coli穿梭载体pHT315去除Bt复制区,构成了一个具有红霉素和氨苄抗性,同时具有多克隆位点的只能在E.coli中复制的载体,命名为pHT315-1.利用pHT315-1,通过部分酶切建库的方法,从近10 000个重组子中得到1个Bt复制区.序列测定结果表明,该复制区为5 273 bps,已在GenBank注册,Accession number 为AY278324.GenBank核酸序列Blast表明,该复制区部分序列与Bt菌株HD263的复制区ori43编码复制蛋白的序列同源性为98%.30℃连续培养72 h,复制区质粒在Bt无晶体突变株HD73cry-中稳定性达98%以上,30 h生长曲线也表明,该复制区质粒对受体菌株无明显不良影响.

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来源
《河北农业大学学报》 |2004年第1期|73-76|共4页
作者
任莹博; 张杰; 宋福平; 李国勋; 王勤英; 黄大昉;
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作者单位

中国农业科学院,植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京,100094;

河北农业大学,河北,保定,071001;

中国农业科学院,植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京,100094;

中国农业科学院,植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京,100094;

河北农业大学,河北,保定,071001;

河北农业大学,河北,保定,071001;

中国农业科学院生物技术研究所,北京,100081;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类昆虫细菌;
关键词
苏云金芽孢杆菌; 质粒复制区; 克隆;

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