两种奶牛真皮成纤维细胞分离培养方法的比较

鲁文赓; 袁思琦; 司琳清; 田春雨; 谢何昕; 周继伟; 金吉东

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两种奶牛真皮成纤维细胞分离培养方法的比较

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为了比较两种体外分离和培养奶牛真皮成纤维细胞方法,采集奶牛蹄部真皮组织,通过组织块贴壁法和双酶消化法(胰蛋白酶-Ⅰ型胶原酶)分离原代奶牛真皮成纤维细胞,通过传代培养进一步纯化并扩增。利用显微镜观察细胞形态及生长特性,MTT法用于绘制细胞生长曲线,利用细胞免疫荧光技术检测其表面标志物,鉴定细胞纯度。倒置显微镜下观察,贴壁后第6天有细胞爬出,形态多呈长梭形,排列紧密呈漩涡状或束状;双酶消化组第2天有长梭形细胞生长,混杂少量上皮细胞生长。生长曲线图表示,组织块贴壁组细胞生长速度较快。免疫化学荧光检测第四代奶牛真皮成纤维细胞,波形蛋白呈阳性表达,角蛋白-18呈阴性表达,表示细胞纯度较高。两种方法均能分离出奶牛真皮成纤维细胞,与双酶消化法相比,组织块贴壁法分离的细胞纯度更高,活性更佳,增殖周期更短,提示组织块贴壁法是分离培养奶牛真皮成纤维细胞的首选方法。

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来源
《黑龙江八一农垦大学学报》 |2023年第1期|41-45|共5页
作者
鲁文赓; 袁思琦; 司琳清; 田春雨; 谢何昕; 周继伟; 金吉东;
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作者单位

黑龙江八一农垦大学动物科技学院;

吉林省榆树市农业综合行政执法大队;

科菲特饲料(长春)有限公司;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类细胞、组织培养技术;
关键词
奶牛; 蹄叶炎; 真皮成纤维细胞; 组织块贴壁法; 双酶消化法;

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