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金黄色葡萄球菌wood46株eno基因的克隆及原核表达

         

摘要

为获得Eno的重组蛋白,采用PCR法从金黄色葡萄球菌wood46株基因组扩增eno基因,并连接到pMD18-T载体上,转化至BL21感受态细胞中;重组质粒经PCR及酶切鉴定后,送上海生工测序.将鉴定正确的质粒酶切回收产物与原核表达载体pET-32a连接,然后转化至BL21感受态细胞,对平板筛选的阳性质粒进行PCR和酶切鉴定.对鉴定正确的重组菌进行诱导表达并纯化.实验结果表明成功构建了pET32a-eno表达载体,并获得了该纯化蛋白.该实验结果为S.aureus亚单位疫苗研究奠定了一定的基础.

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