冷暴露诱导TLR2和TLR4小鼠腹腔原代中性粒细胞形成NETs的初步研究

鞠憬; 徐彬; 刘洋; 曹禹; 胡亚捷; 周万慧; 杨玉英; 李士泽

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中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)是中性粒细胞活化后释放到胞外的一种纤维网状结构,此过程被称为嗜中性粒细胞病(NETosis),近年来被广泛关注。研究目的旨在探讨TLR2和TLR4基因敲除小鼠腹腔原代中性粒细胞(Polymorp honuclears,PMNs)在冷暴露条件下形成NETs的能力。将8只基因敲除小鼠随机平均分为常温对照组(n=4)和4℃冷暴露组(n=4),并将此组小鼠置于4℃人工气候室中饲养3 h·d^(-1),连续一周后处死,提取腹腔原代PMNs。首先采用普通PCR法鉴定小鼠TLR2、TLR4基因成功敲除后,再通过扫描电镜的方法对PMNs形态结构的变化进行定性分析。PicoGreen核酸定量分析试剂盒检测细胞上清液中胞外DNA(Cell free DNA,cfDNA)的浓度,蛋白质免疫印迹方法检测瓜氨酸化的组蛋白(Citrullinated Histone 3,CitH3)和髓过氧化物酶(Myeloperoxidase,MPO)的蛋白表达水平进行定量分析。结果显示:冷暴露组的PMNs表面有明显的皱缩变形,且有类似于伪足结构的NETs生成;NETs的组件蛋白CitH3、MPO的表达水平和cfDNA的浓度均显著升高。冷暴露能够诱导TLR2和TLR4基因敲除小鼠腹腔原代中性粒细胞形成NETs。

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来源
《黑龙江八一农垦大学学报》 |2022年第4期|53-58|共6页
作者
鞠憬; 徐彬; 刘洋; 曹禹; 胡亚捷; 周万慧; 杨玉英; 李士泽;
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作者单位

黑龙江八一农垦大学动物科技学院;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因工程（遗传工程）;
关键词
中性粒细胞; 中性粒细胞诱捕网; 冷应激; TLR2; TLR4;

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