长筒石蒜花青素合成酶基因LlANS的克隆与表达分析

王晰; 丁文杰; 李娅; 刘家伟; 王良桂; 岳远征

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以粉色系长筒石蒜(Lycoris longituba)花瓣为材料,基于前期获得的长筒石蒜转录组数据,通过序列分析结合聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)方法,成功克隆得到长筒石蒜LlANS基因的全长编码序列,并对其进行了生物信息学分析及亚细胞定位观察.结果表明,该基因开放阅读框(Open reading frame,ORF)全长为1068 bp,编码355个氨基酸,蛋白质相对分子质量约为40.08 kD,理论等电点为5.58,属于酸性不稳定的亲水性蛋白;LlANS蛋白属于α-酮戊二酸依赖性双加酶家族,具有典型的花青素合成酶(Anthocyanidin synthase,ANS)蛋白功能结构域2OG-Fell-Oxy;系统进化树分析表明该基因与同属的石蒜和中国石蒜中ANS基因具有较高同源性,最高达97％;亚细胞定位观察显示LlANS蛋白定位于细胞核、细胞质及细胞膜中.此外,实时荧光定量分析证实LlANS基因在长筒石蒜粉色花花蕾期表达量较低,在盛花期的表达量最高.以上结论表明,LlANS作为长筒石蒜花色苷合成途径中的一个关键节点基因,对于长筒石蒜粉色花花色的形成起着极为重要的作用.

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来源
《河南农业大学学报》 |2018年第4期|611-617|共7页
作者
王晰; 丁文杰; 李娅; 刘家伟; 王良桂; 岳远征;
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作者单位

南京林业大学风景园林学院;

江苏省风景园林重点实验室;

江苏南京210037;

南京林业大学风景园林学院;

江苏省风景园林重点实验室;

江苏南京210037;

南京林业大学风景园林学院;

江苏省风景园林重点实验室;

江苏南京210037;

南京林业大学风景园林学院;

江苏省风景园林重点实验室;

江苏南京210037;

南京林业大学风景园林学院;

江苏省风景园林重点实验室;

江苏南京210037;

南京林业大学风景园林学院;

江苏省风景园林重点实验室;

江苏南京210037;

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正文语种 chi
中图分类球根花卉类;
关键词
长筒石蒜; 花青素合成酶; 基因克隆; 亚细胞定位; 表达分析;

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