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首页> 中文期刊> 《河南科技大学学报（自然科学版）》 >胡杨ARGONAUTE1基因克隆与亚细胞定位

胡杨ARGONAUTE1基因克隆与亚细胞定位

         
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以杨树基因组数据库为背景,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法,从胡杨中克隆得到了与拟南芥AGO1 (AtAGO1 )基因同源的全长开放阅读框.测序结果表明:该基因开放阅读框为3 180 bp,编码由 1 059 个氨基酸残基组成的蛋白质.该蛋白质与 AtAGO1 氨基酸相似性为79.5 1%,命名为PeAGO1 .推导PeAGO1 等电点和分子质量分别为9.45 和 1 17 ku,不含信号肽序列,推测 PeAGO1 不是分泌蛋白.系统进化分析表明:胡杨 PeAGO1 蛋白在进化上与桃(Prunus persica)、葡萄(Vitis vinifera L.)、巨桉(Eucalyptus grandis Hill ex Maiden)等木本植物亲缘关系较近,与单子叶植物玉米(Zea mays L.)、水稻(Oryza sativa)等亲缘关系较远.构建细胞定位检测载体35S∷GFP-PeAGO1,采用原生质体转化法将其瞬时表达于 84K 杨树叶片中.激光共聚焦显微镜观察结果表明:PeAGO1 蛋白定位于细胞核中.

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