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降解黄曲霉毒素B1菌株发酵工艺的研究

         

摘要

对黄曲霉毒素B1(AFB1)降解菌株克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)XY1降解AFB1进行发酵工艺的优化,主要包括培养基成分和培养条件的优化.对培养基成分的优化主要包括:碳源,如葡萄糖、可溶性淀粉、甘露醇、玉米芯粉、蔗糖、α--乳糖、D-果糖;氮源,如牛肉膏、硝酸铵、硝酸钠、蛋白胨、尿素、胰蛋白胨、酵母浸粉;金属离子,如CaCl2、MgCl2、FeCl2、ZnSO4、CuSO4、MnCl2;培养条件主要包括温度、起始pH、接种量、装液量等.选出最佳碳源、氮源和金属离子,设计新的培养基组成,根据单因素试验结果,运用Box-Behnken设计原理,设计响应面试验,对培养基配方进行最优化分析.结果表明:模型(P=0.001 4)在1%水平上具有极显著性,失拟项不显著(P=0.065 2>0.05),其R2=0.943 1,Radj =0.870 1,说明该模型拟合程度良好,可以模拟94.31%的AFBt降解率变化,其中玉米芯粉对AFB1降解率的影响最大.确定最优发酵培养基配方:玉米芯粉添加量1.06%;胰蛋白胨添加量1.32%;CaC12添加量0.036 mol/L.最佳发酵条件:起始pH值为7.0、温度34℃、接种量6% (V/V)、装液量25 mL/250 mL,降解时间72 h.经发酵工艺优化,Klebsiellasp.XY1对AFB1降解率由71.91%升高到95.13%.

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