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降钙素原(PCT)单克隆抗体的制备及其在血清学检测中的应用

         

摘要

以高纯度的PCT抗原免疫BALB/c小鼠,制备单克隆抗体并以此抗体作为包被抗体,通过包被液和封闭液的选择及条件优化,最终建立PCT双抗体夹心ELISA的血清学定量检测方法.建立的PCT双抗体夹心ELISA检测方法的灵敏度和特异性分别达到95.6%和97.8%,最佳的包被抗体浓度为400 ng/mL,酶标二抗的稀释度为1∶8 000,最适宜的缓冲液以及反应条件分别为包被液使用pH9.6的0.05 mol/L CB 4℃下包被12 h,封闭液使用0.6%BSA 37℃下封闭2h.建立的PCT双抗体夹心法与罗氏试剂盒的定量检测结果呈现良好的相关性,是一种灵敏度高、特异性强、稳定可靠的血清学定量检测方法,为进行PCT的深入研究奠定了基础.

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