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miR-21调节缺血缺氧诱导的大鼠肝卵圆细胞自噬的研究

         
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摘要

目的 探讨miR-21在缺血缺氧诱导的大鼠肝卵圆细胞自噬中的作用.方法 体外培养肝卵圆细胞,慢病毒转染肝卵圆细胞构建稳定的细胞株,分别提取各组细胞RNA逆转录后行SYBR Green实时荧光定量PCR,检测各组miR-21的表达,以转染好的稳定的细胞建立缺血缺氧模型,共分为3组:miR-21空载体慢病毒转染HOC自噬组,miR-21增强慢病毒载体转染HOC自噬组,miR-21-inhibition慢病毒载体转染HOC自噬组.Hoechst 33258染色观察细胞凋亡;应用丹(磺)酰戊二胺(Monodansylcadaverine,MDC)染色荧光定位法、观察各组细胞的自噬;免疫印迹法(Western blotting)检测各组细胞LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白表达情况.结果 与空载体组比,增强组miR-21基因水平表达增强,而MDC染色减弱(自噬减少),蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值减少;而抑制组miR-21基因水平表达减少,MDC染色增强(自噬增强),蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值增多.结论 抑制miR-21过表达可以增强缺血缺氧引起的肝卵圆细胞的自噬,有利于肝卵圆细胞在缺血缺氧微环境中稳定细胞内环境,维持细胞的存活.

著录项

  • 来源
    《肝胆胰外科杂志》 |2016年第1期|46-50|共5页
  • 作者

    高胜强; 陈冬冬; 黄立栋; 戴瑞杰; 胡伟建; 余华军; 张启瑜; 单云峰;

  • 作者单位

    温州医科大学附属第一医院肝胆外科,浙江温州325000;

    温州医科大学附属第一医院肝胆外科,浙江温州325000;

    温州医科大学附属第一医院肝胆外科,浙江温州325000;

    温州医科大学附属第一医院肝胆外科,浙江温州325000;

    温州医科大学附属第一医院肝胆外科,浙江温州325000;

    温州医科大学附属第一医院肝胆外科,浙江温州325000;

    温州医科大学附属第一医院肝胆外科,浙江温州325000;

    温州医科大学附属第一医院肝胆外科,浙江温州325000;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 细胞生物化学;
  • 关键词

    microRNA-21; 自噬; 肝卵圆细胞;

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