E-cadherin启动子的荧光示踪体系的建立及验证

谭拥军; 吴东丽; 余雳; 陈燕

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E-cadherin启动子的荧光示踪体系的建立及验证

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为实现对肺癌A549细胞的EMT示踪,构建了E-cadherin基因启动子的慢病毒质粒,并与包装质粒pVSVG、Δ8.91共转染HEK293T细胞,包装成有活性的慢病毒,收取病毒感染A549细胞,利用流式细胞仪和Western blot检测感染成功.进一步用TGF-β诱导感染成功的A549细胞,通过在荧光显微镜下观察荧光变化、荧光定量PCR和Western blot检测GFP和E-cadherin的变化,发现在TGF-β诱导48 h后,A549细胞形态由鹅卵石样变成长梭形.并且荧光显微镜观察到相比较于未诱导的细胞,诱导后的A549细胞绿色荧光明显变暗,同时GFP和E-cadherin的RNA水平和蛋白质表达水平均降低.以E-cadherin基因启动子为基础建立了A549细胞的EMT荧光示踪体系,为进一步研究肺癌的EMT过程提供了材料.

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来源
《湖南大学学报：自然科学版》 |2020年第12期|131-136|共6页
作者
谭拥军; 吴东丽; 余雳; 陈燕;
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作者单位

湖南大学生物学院;

湖南长沙410082;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因载体;
关键词
启动子; E-cadherin; 示踪; 肺癌; 细胞;

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