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体外诱导人骨髓间质干细胞分化为肝细胞样细胞

         

摘要

目的:探讨人骨髓间质干细胞(MSCs)在体外特定条件下是否可以转化为肝细胞样细胞。方法:分离培养人骨髓间质干细胞,采用肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibrob lastgrowth factor,bFGF)及CC l4损伤的小鼠肝脏共培养等诱导方式,在不同时间点分别用RT-PCR和荧光定量PCR检测肝细胞特异性基因的表达,免疫组织化学染色检测肝细胞标志。结果:在HGF和bFGF诱导第7天时甲胎蛋白(alphafetal prote in,AFP)、细胞角蛋白18(cytokeratin-18,CK18)和色氨酸2,3-双加氧酶(tryptophan 2,3-d ioxygenase,TDO)基因表达阳性,CK18和TDO的表达随诱导时间延长增高;第7天诱导细胞组织化学染色AFP、白蛋白(ALB)、肝细胞核因子(hepatocyte nuc lear factor,HNF)、肝细胞特异性抗原(HSA)和CK18表达阳性。与损伤小鼠肝组织共培养21 d后细胞表达AFP和TDO。结论:HGF和bFGF联合诱导以及与CC l4损伤肝组织共培养的方法可体外促进人MSCs分化为肝细胞样细胞,可为肝脏疾病或肝损伤的干细胞治疗提供细胞来源。

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