伤寒沙门菌fljB∶∶lacZ变异株的制备

朱超望; 茅凌翔; 徐顺高; 黄新祥

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目的:为研究伤寒沙门菌z66鞭毛抗原编码基因fljB的表达调节机制,建立该fljB基因的β-半乳糖苷酶基因(lacZ)插入变异株。方法:采用自杀质粒介导的同源重组方法进行制备。设计加接KpnⅠ和SalⅠ的特异性引物,用PCR扩增获得fljB基因的上、下游同源性DNA片段,并与用KpnⅠ和SalⅠ酶切pSV-β-半乳糖苷酶载体(pSV-β-galactosidase vector)的片段定向连接,将连接片段克隆至自杀质粒pGMB151,再通过电击法将重组质粒转入伤寒沙门菌,在含X-Gal的蔗糖平板上筛选获得同源重组的变异株。结果:经筛选获得阳性克隆,经PCR及序列分析证实,fljB基因中的763 bp被3550 bp的lacZ片段替代。结论:成功构建伤寒沙门菌flj∶∶lacZ突变株,为进一步研究fljB基因表达调节机制奠定了基础。

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来源
《江苏大学学报：医学版》 |2008年第2期|93-96|共4页
作者
朱超望; 茅凌翔; 徐顺高; 黄新祥;
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作者单位

江苏大学医学技术学院生物化学研究室;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类免疫分子遗传学;
关键词
伤寒沙门菌; 舻基因; β-半乳糖苷酶基因; 基因融合;

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