mGITRL真核表达质粒的构建及其在Lewis细胞中的表达

胡正军; 王胜军; 朱燕萍; 鲍俊峰; 仝佳; 马洁; 成军; 孙长贵; 许化溪

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mGITRL真核表达质粒的构建及其在Lewis细胞中的表达

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目的:构建含小鼠GITRL基因的真核表达质粒pIRES2-eGFP/mGITRL,体外转染小鼠肺癌细胞株Lewis细胞。方法:利用PCR方法扩增mGITRL基因,克隆至pIRES2-eGFP载体,选择阳性克隆并进行序列测定。以电穿孔法转染Lewis细胞,通过G418筛选,获得稳定表达细胞株。结果:构建了真核表达质粒pIRES2-eGFP/mGITRL,基因测序与GenBank中发表的序列完全一致,体外转染Lewis细胞,经G418筛选,体外传代30代以上,RT-PCR及流式细胞仪检测该细胞株稳定表达mGITRL。结论:成功构建了真核表达质粒pIRES2-eGFP/mGITRL,并在小鼠Lewis细胞中稳定表达,为进一步研究GITRL的生物学功能提供研究基础。

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来源
《江苏大学学报：医学版》 |2008年第2期|107-110|共4页
作者
胡正军; 王胜军; 朱燕萍; 鲍俊峰; 仝佳; 马洁; 成军; 孙长贵; 许化溪;
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作者单位

江苏大学医学技术学院免疫学与免疫检验学系;

中国人民解放军117医院;

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正文语种 chi
中图分类基因工程（遗传工程）;医学免疫学;
关键词
GITRL; 细胞转染; 肿瘤;

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