携带抗FAP×抗CD3双特异性抗体重组溶瘤痘病毒的构建及其抗癌活性观察

施晋升; 李峰; 吴思慧; 俞力超; 刘黎琼; 于峰

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目的:构建携带抗成纤维细胞活化蛋白(fibroblast activation protein,FAP)和抗小鼠CD3分子的双特异性抗体溶瘤痘病毒(r VVDD-BiTE. FAP),并体外检测该病毒对过表达FAP小鼠肺癌细胞株抑制作用。方法:利用同源重组技术将PF17R启动子调控的Bi TE-FAP基因和PSEL启动子调控的DsRed基因克隆入缺失痘苗生长因子(vaccinia growth factor,VGF)基因的v SC20亲本病毒TK基因处,经软琼脂空斑筛选获得VGF和TK双基因缺失的重组溶瘤痘病毒r VVDD-BiTE. FAP。采用空斑计数法比较重组溶瘤病毒和亲本病毒v SC20在小鼠肺癌细胞株中的复制能力;采用MTS法检测重组溶瘤病毒r VVDD-BiTE. FAP和r VVDD-GFP对小鼠肺癌LLC细胞株的抑制效果,并用MTS、LDH实验进一步检测溶瘤病毒和小鼠脾脏T细胞对靶细胞的协同杀伤效果,采用ELISA法检测细胞因子IL-2和IFN-γ的表达。结果:通过同源重组技术和软琼脂空斑法筛选获得r VVDD-BiTE. FAP重组溶瘤痘病毒。r VVDD-BiTE. FAP与亲本病毒具有同等复制能力;小鼠T细胞能够增强r VVDD-BiTE. FAP抗肿瘤效果。结论:r VVDD-BiTE. FAP具有高效抗肿瘤活性。

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来源
《江苏大学学报：医学版》 |2019年第4期|327-332|共6页
作者
施晋升; 李峰; 吴思慧; 俞力超; 刘黎琼; 于峰;
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作者单位

江苏大学附属医院心胸外科;

江苏镇江212001;

江苏大学医学院;

江苏镇江212013;

深圳市南山区人民医院血液科;

广东深圳5180052;

江苏大学生命科学研究院;

江苏镇江212013;

上海市肿瘤研究所癌基因及相关基因国家重点实验室;

上海200032;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 R734.204;
关键词
溶瘤痘病毒; 双特异性抗体; 成纤维细胞活化蛋白; 肺癌; 肿瘤细胞; 靶向免疫治疗;

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