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首页> 中文期刊> 《江苏大学学报：医学版》 >米贝地尔增强3,3′二吲哚甲烷对肝癌细胞的抑制作用

米贝地尔增强3,3′二吲哚甲烷对肝癌细胞的抑制作用

         
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目的:探讨T型钙通道阻滞剂米贝地尔对3,3′二吲哚甲烷(3,3′-diindolylmethane,DIM)抗肝癌效应的影响及其潜在的分子机制。方法:选用肝癌SMMC-7721和HepG2细胞,分别设4组,对照组用含10%胎牛血清的高糖培养基培养24.5 h;米贝地尔组用5μmol/L米贝地尔处理24.5 h;DIM组用60μmol/L DIM处理24.5 h;米贝地尔+DIM组用5μmol/L米贝地尔预处理0.5 h,再与60μmol/L DIM共同处理24 h;采用倒置显微镜观察细胞的形态学变化;采用CCK-8法检测各组细胞增殖活力;Hoechst 33342染色观察细胞凋亡水平,蛋白免疫印迹法检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、裂解的半胱氨酸蛋白酶3(cleaved-caspase 3)以及磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(phosphorylation of p38 mitogen activated protein kinase,p-p38 MAPK)表达水平;以Fluo-3/AM为探针,观察肝癌细胞胞质游离钙(cytosolic free calcium,[Ca^(2+)]i)水平。结果:与对照组相比,DIM组细胞增殖活力下降,PCNA表达明显降低,凋亡水平升高,cleaved-caspase 3、p-p38 MAPK表达水平明显升高(P均<0.05);部分细胞形态消失,[Ca^(2+)]i荧光增强。与DIM组相比,米贝地尔+DIM组细胞增殖活力明显降低,PCNA表达明显下降,凋亡水平进一步升高,且cleaved-caspase 3、p-p38 MAPK表达水平进一步升高(P均<0.05);多数细胞形态消失,[Ca^(2+)]i荧光增强更明显。结论:T型钙通道阻滞剂米贝地尔可增强DIM抗肝癌作用,可能与[Ca^(2+)]i水平增加以及p-p38 MAPK表达升高有关。

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