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母系胚胎亮氨酸拉链激酶基因在肝癌中的表达及siRNA干扰后对肝癌细胞Hep3B生长、凋亡的影响

         
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目的 探讨母系胚胎亮氨酸拉链激酶(MELK)基因在肝癌中的表达及siRNA干扰后对肝癌细胞Hep3B生长、凋亡的影响.方法 利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术和实时定量PCR技术检测MELK基因在肝癌和癌旁组织中的表达差异；评价MELK与肝癌早期指标甲胎蛋白(AFP),δ1样同系物(DLK1)在48例肝癌样本中表达的关系；采用化学合成siRNA沉默内源性MELK基因表达,分析肝癌细胞Hep3B的生长活性、凋亡.结果 在半定量PCR检测的72例肝癌患者中,55例癌组织中MELK基因mRNA的表达水平高于相应癌旁组织；实时定量PCR结果显示MELK基因在肝癌组织中的表达量显著高于癌旁组织(P ＜0.001).MELK、AFP、DLK1在肝癌样本中的阳性率分别为66.7％、50％、54.2％,MELK在肝癌中的阳性比例高于AFP、DLK1；干扰MELK基因在肝癌细胞Hep3B中的表达可抑制细胞生长.结论 MELK激酶作为胚胎干细胞标志性基因在肝癌发生时高表达,是治疗肝癌的潜在靶基因.%and apoptosis and to discuss the feasibility that MELK kinase acts as a potential target gene against cancer stem cells in hepatocellular carcinoma. Methods By applying reverse transcription polymerase chain reaction and real time polymerase chain reaction, the different expressions of MELK mRNAs in tumor and non-tumor tissues of hepatocellular carcinoma (HCC) samples were examined; the relationship of MELK, alpha-fetal protein (AFP) and delta-like 1 homolog (DLK1) were further evaluated in 48 HCC patients to determine different subtype of HCC samples according to the expression pattern of these progenitor cell markers. The cellular viability and apoptosis were analyzed when MELK is interfered by chemically synthesized siRNAs in Hep3B cells. Results Reverse transcription polymerase chain reaction analysis showed that MELK mRNA had increasing expressions in 55 of 72 HCC samples, compared with corresponding non-tumor tissues. It showed that MELK expressions of 24 HCC samples were significantly higher than the corresponding non-tumor livers (P <0.001). Three embryo/progenitor markers, MELK, AFP and DLK1, expressed in 66.7%, 50% and 54.2% of HCC samples respectively, where the positive ratio of MELK expression was higher than AFP and DLK1. Knockdown MELK through siRNAs could inhibit cell viability, and promote cell apoptosis. Conclusion MELK gene, as an embryo marker, up-regulating in human hepatocellular carcinoma, can act as a potential therapy target of HCC.

著录项

  • 来源
    《兰州大学学报（医学版）》 |2012年第1期|16-2024|共6页
  • 作者

    张壮壮; 李坤雨; 王玉平; 韩泽广; 邓庆;

  • 作者单位

    上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液学研究所,上海200025;

    上海市疾病与健康基因组学;

    上海市疾病与健康基因组学;

    上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液学研究所,上海200025;

    上海市疾病与健康基因组学实验室-省部共建国家重点实验室培育基地、国家人类基因组南方研究中心 上海201203;

    上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液学研究所,上海200025;

    上海市疾病与健康基因组学实验室-省部共建国家重点实验室培育基地、国家人类基因组南方研究中心 上海201203;

    上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液学研究所,上海200025;

    上海市疾病与健康基因组学实验室-省部共建国家重点实验室培育基地、国家人类基因组南方研究中心 上海201203;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 R341;
  • 关键词

    母系胚胎亮氨酸拉链激酶; 基因; 肝癌;

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