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人类ZAKβ与YWHAZ蛋白相互作用的初步研究

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目的研究ZAKl5与YWHAZ蛋白之间的相互作用。方法以ZAKl5为诱饵蛋白，利用酵母双杂交筛选人类肝脏cDNA文库，经GSTPull—down、免疫共沉淀和细胞共定位实验分别验证ZAKl5与猎物蛋白在体外和细胞内的相互作用，构建ZAKl5的截短体以确定相互作用的区域，用磷酸化抗体检测ZAKl5在相互作用中的磷酸化作用，并通过流式细胞仪检测这对蛋白相互作用对细胞周期的影响。结果利用酵母双杂交筛选到一个能与ZAKl5相互作用的蛋白YWHAZ，并在体外和细胞内都验证了这二者的相互作用，发现这两个蛋白都能共定位于293T细胞的胞质中，确定了ZAKl5的N端1—250氨基酸为与YWHAZ蛋白相互作用的区域。体外实验发现了这二者的相互作用涉及到磷酸化反应，发现这对蛋白的相互作用能提高293T细胞的G，期水平。结论首次发现并证实了ZAKl5和YWHAZ之间的相互作用，发现该相互作用涉及到磷酸化过程并能够对细胞周期产生影响。

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来源
《医学分子生物学杂志》 |2008年第1期|1-6|共6页
作者
赵晶; 王玮; 马雅婷; 施慧莉; 霍克克;
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作者单位

复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室;

上海市200433;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类生物大分子的结构和功能;
关键词
ZAKβ; YWHAZ; 丝裂原活化蛋白激酶; 磷酸化; 细胞周期;

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