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grp78真核表达载体构建及其稳定转染HeLa细胞系建立

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目的构建人grp78基因真核表达载体，并建立稳定高表达grp78的人宫颈癌HeLa细胞系。方法用RT—PCR方法从人宫颈癌HeLa细胞中扩增grp78基因编码区，将PCR产物克隆到pcDNA3．1（＋）真核表达载体，构建重组质粒pcDNA3．1（＋）／grp78并测序鉴定。用构建成功的pcDNA3．1（＋）／grp78真核表达载体转染入人宫颈癌HeLa细胞，经G418筛选获得grp78稳定高表达的HeLa细胞系，并用RT—PCR及Western印迹方法鉴定。结果成功构建pcDNA3．1（＋）／grp78真核表达载体，筛选获得稳定高表达人grp78的HeLa细胞系。结论grp78真核表达载体的成功构建和稳定高表达grpTS的HeLa细胞系的建立为进一步研究grp78的功能奠定了基础。

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来源
《医学分子生物学杂志》 |2011年第4期|309-312|共4页
作者
王恬; 陶涛; 杨润峰; 吴章颖; 李伟; 廖书杰; 王世宣;
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作者单位

华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科妇科肿瘤实验室;

武汉市430030;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 R349.64;
关键词
人grp78基因; 载体构建; 转染; 基因表达;

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