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在宿主细胞内仅有部分慢病毒载体发生了功能性整合

         

摘要

目的研究慢病毒在感染细胞后,是否全部整合入染色体。方法用慢病毒载体的假病毒感染293T细胞后.抽提培养2d和10d的细胞基因组DNA。通过定量PCR检测细胞基因组中LTR拷贝数,计算出整合率。分别取病毒感染3d和11d的细胞,离心重悬后取部分细胞放在荧光显微镜下拍照,在蛋白水平上验证此结论。结果①慢病毒载体在宿主细胞基因组内的平均整合率(47±16)%(n=10);②细胞感染慢病毒后3d和11d的GFP照片也证实了慢病毒在宿主细胞基因组内部分整合。结论慢病毒载体的假病毒感染293T细胞后,仅有部分的载体骨架是整合人基因组中的,整合入293T细胞基因组中的外源基因能够较长时间稳定表达。

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