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胡椒醛缩氨基均三唑席夫碱对人肝癌细胞分化和凋亡的影响

         

摘要

目的观察胡椒醛缩氨基均三唑席夫碱对人肝癌细胞BEL-7402的诱导分化和凋亡作用。方法用不同浓度的1-(3,4-二氧亚甲基)苯甲亚氨基-2-吡啶-3-基-5-甲硫基-[1,2,4]三唑(LH-36)与BEL-7402细胞体外培养。MTT法检测细胞增殖和LH-36对细胞增殖的抑制作用。用Hoechst33258荧光染色观察细胞凋亡变化。免疫细胞化学检测细胞内激活型Caspase-3表达。反转录聚合酶链反应(RT—PCR)方法检测细胞甲胎蛋白(α—FP)和白蛋白(Alb)mRNA表达,以了解细胞分化状态。蛋白质免疫印迹分析P53的表达。可见光法测定超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活力。结果LH-36在0.1μmol/L-10μmol/L的浓度范围能抑制细胞增殖,且抑制率随浓度和时间的增加而增高。0.1μmol/L和1.0μmol/L的LH-36使细胞α—FPmRNA表达量明显下降,Alb表达量增高,P53的蛋白表达明显增加,SOD活性升高(P〈0.01),而CAT活性降低,差异有显著性(P〈0.01,P〈0.05)。药物浓度在10μmol/L作用48h,BEL-7402细胞皱缩,呈现凋亡各期改变,Caspase-3阳性细胞明显增加,细胞凋亡率显著高于对照组(P〈0.05)。结论胡椒醛缩氨基均三唑席夫碱对人肝癌BEL-7402细胞具有抗增殖、促分化和凋亡作用,作用可能与过氧化氢的氧化损伤作用有关。

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